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腦聲常談:介紹幾種斑馬魚視覺行為學實驗的測試方法(2)

視動反應(optomotor response, OMR)


視動反應是指斑馬魚對移動的目標有一種追逐 的行為,該反應可以用來檢測幼魚和成魚的視覺相 關基因突變。幼年斑馬魚發生明顯視動反應的時期一般在7dpf 左右。將幼魚放在一個狹窄的長方形水缸中,在魚缸底部放置一個顯示器,當顯示器中的光 柵朝向某個方向運動時,斑馬魚會朝著光柵移動的 方向運動。多條魚進行實驗時,光柵發散或聚集, 魚群會表現出相應的群體反應(圖 2)。通過不斷變換光柵的呈現模式,可以篩選那些對光柵方向改變反應遲鈍的個體,以達到篩選視覺基因缺陷體的目的。因為可以將多個魚缸并聯使用,由此可見這是 一種高通量的篩選方法。



成年斑馬魚的視動反應裝置與幼年斑馬魚的眼 動反應裝置有點類似(圖3)。斑馬魚在一個透光性 好的圓形魚缸中可以自由游動,魚缸中放置一個小圓柱以阻擋斑馬魚穿過中心區域游動。在魚缸的外圍放置一個可以轉動的塑料圓柱,塑料圓柱上貼上一張黑白條紋相間的白紙,在環形光源的照射下可以產生一組具有時間頻率和空間頻率的光柵.當光柵轉動時斑馬魚會追隨光柵圍繞魚缸做圓周運動,改變光柵的轉動方向,斑馬魚會對移動方向做出相應的調整。Maaswinkel 等的研究發現,斑馬魚對 低空間頻率的光柵刺激會有一個明顯的追隨反應, 而對于高空間頻率具有頻率選擇作用,對于時間頻率的反應取決于光柵的空間頻率,固定空間頻率的情況下不同時間頻率有不同的追隨偏好。

逃避反應(escape response)


Li 等1997 年曾使用該行為來定量地分析斑馬魚的視覺敏感性。斑馬魚放在一個類似于成年斑 馬魚視動反應的裝置中(圖 4),外周的轉筒上涂上 一個某種顏色的條帶或圖案。正常情況下斑馬魚會繞擋筒做緩慢的游動,當條帶刺激出現在斑馬魚的視野中時,斑馬魚會迅速地決定是否要游開這個區域以躲避這個“捕食者”。這種逃脫行為一般情況下是很明顯的,正常的野生型斑馬魚在 50 次刺激 當中會有 42 次左右的正向逃脫行為。如果成年斑馬魚對某個顏色習慣之后可以更換一種顏色刺激.調節刺激條帶的光學強度,可以檢測斑馬魚逃避反應的激發閾值。

背光反應(dorsal light reflex, DLR)

斑馬魚野外生存環境中太陽光從其背部投射下來,因此它們都有一個背向光源的習性,這個反應 一般需要身體平衡感覺和視覺的參與。將斑馬魚倒 置或傾斜在一個比較狹小的玻璃管中,光源從魚的側面投射過來時,斑馬魚會轉動身體以背對光源。 而當光源繞著玻璃管緩慢旋轉時,它也會緩慢地旋轉著自己的身體。這個反應在斑馬魚的視覺功能檢測中可以簡單地檢測不同波長的視覺敏感性。但是Nicolson 等的研究指出,在斑馬魚的背光反應中,發生明顯旋轉障礙的魚是那些平衡感覺存在缺 陷的突變體,而視覺信息在其中的作用不是十分地重要。


文章摘錄來源

生物化學與生物物理進展,斑馬魚行為學實驗在神經科學中的應用》,鄒蘇琪,殷梧 ,楊昱鵬, 陳林,胡兵,DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00403


動物行為分析軟件:

1、VisuTrack軟件

2、SuperMaze軟件

3、FishTrack斑馬魚分析軟件

動物行為儀器:

1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機、各類經典迷宮等

2、動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀

3、動物主動步態分析、動物被動步態分析、動物自由步態分析(內測中)

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等

神經電生理:

1、光遺傳、無線光遺傳

2、光纖記錄系統(單通道、多通道)

3、電生理信號采集系統(腦電、肌電等)


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