鉛是一種神經發育毒物，它對神經細胞的正常發育以及神經遞質的正常分泌產生影響和損害[1]，故而，進一步影響學習和記憶能力。海爾福口服液是我院研制生產的保健口服液，已初步證明了其有明顯升高鉛中毒小鼠Hb含量、降低ALT活性等作用[2]。為了進一步研究海爾?？诜簩︺U中毒所致小鼠記憶障礙的影響作用并分析其機制，我們曾用復雜迷宮趨食法測定小鼠記憶障礙的改善情況，結果較理想，為進一步驗證其療效，本文用Y型水迷宮測定小鼠的逃避潛伏期和平均逃避達標率。有報道鉛中毒者血鉛與血鋅水平呈負相關，認為糾正缺鋅狀態是減少腸道對鉛吸收的重要措施[3]，因此，我們嘗試用鋅**鉛中毒小鼠，觀察其改善記憶障礙的作用，并分析鋅與海爾?？诜涸?*鉛染毒所致小鼠記憶障礙中的作用關系。
1 資料與方法
1.1 實驗動物 昆明種健康雄性小鼠60只，鼠齡35天，平均體重20g。由右江民族醫學院動物室（合格）提供。
1.2試劑 醋酸鉛為國產分析純；海爾?？诜海ㄓ摄y花、茯苓、甘草等中藥，經水提取、乙醇沉淀等流程制成）由本院海爾福研制中心提供；葡萄糖酸鋅口服液由哈藥集團三精制藥有限公司生產（批號：05040331）。
1.3 Y型水迷宮測定方法 Y型水迷宮是測定小鼠辨別性記憶的*簡單*常用的方法，該裝置分長臂端和兩分枝短臂端。長臂端長40cm , 寬15 cm，短臂端長30cm, 寬15 cm。長、短臂高均為20 cm。左側短臂裝有平臺，供小鼠棲身，右側短臂用木板蓋上，作為暗道，水深10cm，水溫（28±0.5）℃。。實驗時將小鼠尾對叉路從長臂端輕輕放入水中，以其在10s內直接抵達平臺為正確反應。小鼠抵達平臺休息15s再重復訓練，每天訓練10次，連續5天，以每組平均正確反應率和抵達平臺所需時間(逃避潛伏期)作為評價記憶的指標[4]，逃避潛伏期若超過10s則以10記錄。
1.4 動物染毒和**方法 60小鼠隨機分成5組：鋅**組、鋅加海爾福**組、海爾福**組、單純染鉛組、陰性對照組。除陰性對照組外，其余4組均用2g/L的醋酸鉛水溶液，按每克體重0.007ml劑量作腹腔注射染毒，每天1次，連續35天；陰性對照組用等體積的生理鹽水腹腔注射。染毒14天后，鋅**組用葡萄糖酸鋅水溶液灌胃，劑量按每只鼠0.02mg，每天1次；海爾福**組用海爾?？诜?，劑量為每鼠0.1ml，用蒸餾水稀釋1倍后灌胃，鋅加海爾福**組用葡萄糖酸鋅加海爾?？诜夯旌虾蠊辔?，劑量與鋅**組和海爾福**組相同；單純染鉛組和陰性對照組用等體積的蒸餾水灌胃，每天1次，直至實驗結束。
1.5 統計學分析 用SPSS 10.0 統計軟件包，進行方差分析。
2. 結果
2.1逃避潛伏期比較 單純染鉛組的逃避潛伏期長，與其他4組比較差異有顯著性（p<0.01和p<0.05）。海爾福**組和鋅**組的逃避潛伏期比鋅加海爾福**組為短，差異有顯著性（p<0.05）。從測試第1天到第5天，各組的逃避潛伏期以第1天*長，然后逐漸縮短，差異有顯著性（p<0.01）。見表1。
表1 各組小鼠用Y型水迷宮所測的逃避潛伏期比較（X±S，S）
第1天 第2天 第3天 第4天 第天 合計 |
鋅**組 4.82±0.72 3.92±0.51 3.25±0.48 3.15±0.80 2.78±0.80 3.66±0.98Δ* 鋅加海爾福**組 5.30 ±1.32 4.28±1.38 3.86±1.08 3.56±1.31 3.24±0.62 4.10±1.32# 海爾福**組 5.，Δ* 合計 5.45 ±1.29 4.18±0.89▽ 3.43±1.00▽ 3.27±0.94▽3.28±1.02▽ |
注：與單純染鉛組比較，Δp<0.01，#p<0.05；與鋅加海爾福**組比較，*p<0.05；與第1天比較，▽p<0.01。
2.2 平均逃避達標率比較 鋅加海爾福**組和單純染鉛組的平均逃避達標率較其他3組低，鋅**組與單純染鉛組比較，差異有顯著性（p<0.05）。從第1天到第5天，各組平均逃避達標率總體上逐漸提高。見表2。
表 2 各組小鼠用Y型水迷宮所測的平均逃避達標率比較（X±s）
第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 合計 |
鋅**組 83.85±0.07 90.63±0.06 95.01±0.05 98.10±0.04 97.15±0.04 94.20±0.06# 鋅加海爾福**組 77.55±0.15 90.55±0.06 90.25±0.10 96.12±0.05 95.15±0.12 89.05±0.11 海爾福**組 73.23±0.19 88.35±0.08 96.15±0.05 100.00±0.00 97.38±0.05 91.27±0.13 單純染鉛組 77.35±0.15 88.25±0.13 90.44±0.06 92.23±0.08 96.36±0.05 88.15±0.11 陰性對照組 75.16±0.19 91.28±0.07 96.24±0.08 98.74±0.04 98.80±0.04 92.70±0.15 合計 79.46± 0.17 90.46±0.06 ▽ 93.33±0.08▽ 97.25±0.05▽ 96.36±0.06▽ |
注：與單純染鉛組比較，#p<0.05；與第1天比較，▽p<0.01。
3. 討論
本實驗用Y型水迷宮測定小鼠的記憶能力，鋅**組和海爾福**組的逃避潛伏期比單純染鉛組短，平均逃避達標率提高，說明海爾?？诜汉推咸烟撬徜\均對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用，效果較好。鋅具有很強的誘導金屬硫蛋白（MT）作用，MT與鉛結合可使鉛失去毒性[5]；鋅還能拮抗鉛對ALAD的抑制作用。本實驗結果與此報道一致。海爾?？诜菏怯摄y花、茯苓、甘草等中藥提煉而成，其中的茯苓等有較強抗氧化作用。而鉛致腦組織脂質過氧化是引起神經行為改變的生物學基礎之一[6]，故較強的抗氧化成分可能是海爾?？诜?*鉛中毒所致小鼠的記憶障礙的原因之一，其機制有待進一步研究。
各組平均逃避達標率比較，差異不大，僅鋅**組同單純染鉛組比較，差異有顯著性。原因可能為實驗時間較短，鉛中毒小鼠的辨別性記憶損害尚不明顯，表現為平均逃避達標率的雖有提高，但各組間差異不顯著。
在實驗結果中我們發現，鋅加海爾福**組對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用，但同鋅**組和海爾福**組的**效果比較，逃避潛伏期延長，平均逃避達標率降低，提示海爾?？诜汉推咸烟撬徜\在**鉛中毒所致小鼠的記憶障礙上可能有一定拮抗作用，其機制不詳，有待進一步研究。
